પોલિઆક્રિલામાઇડ જેલ ઇલેક્ટ્રોફોરેસિસ માટેની સાવચેતી

· પોલિઆક્રિલામાઇડજેલે ry ક્રિલામાઇડ મોનોમર, પોલિમરાઇઝેશન પ્રારંભિક સામગ્રી, ઉત્પ્રેરક અને મીઠું અને બફર મિશ્રણનો અધિકાર એક સાથે હોવો જોઈએ.

· આવરણઅને બીઆઈએસ (એન, એન '- મેથિલિન ડબલ ry ક્રિલામાઇડ) એ મોનોમર ફોર્મ જેલ મેટ્રિક્સ છે.

· એમોનિયમ પર્સ્યુફેટ એડહેસિવ પોલિમરાઇઝેશન પ્રક્રિયા શરૂ કરો. ગુંદરની રચના માટે પાણીમાં તૈયાર 10% એમોનિયમ પર્સ્યુફેટ સોલ્યુશનની જરૂર છે. મોટાભાગની માહિતી સક્રિય ઉપયોગની જરૂરિયાત દર્શાવે છે. જો કે, 10% સોલ્યુશન પ્રવૃત્તિના નોંધપાત્ર નુકસાન વિના કેટલાક અઠવાડિયા માટે 4 at પર મૂકી શકાય છે. જ્યારે ગુંદર એકંદર કરવામાં નિષ્ફળ જાય ત્યારે 10 એમએલ સુધી બનાવો અને કા discard ી નાખો.

ટીપ: ટકાવારીઆવરણસિક્વન્સિંગમાં ગુંદર અને પ્રોટીન ગુંદર સમાન નથી. જો પ્રિમેડ ry ક્રિલામાઇડનો ઉપયોગ કરો: બિસ સોલ્યુશન, યોગ્ય બોટલ મેળવવાની ખાતરી કરો.

· ટેમ્ડ (એન, એન, એન ', એન'- ટેટ્રેમેથિલ ઇથિલેનેડીઆમાઇન) રેફ્રિજરેટરમાં મૂકવામાં આવેલી ભૂરા બોટલમાં એક ઉત્પ્રેરક છે. ગુંદર રેડતા પહેલા ઉમેરો.

Boly પોલિઆક્રિલામાઇડ ઇલેક્ટ્રોફોરેસિસનો ઉપયોગ ઇલેક્ટ્રોફોરેસિસમાં ગ્લાસનો ઉપયોગ દરેક સમય પહેલાં અને પછી ધોવા જોઈએ. ઇલેક્ટ્રોફોરેસિસ પછી, ગરમ સાબુવાળા પાણીમાં નરમ બ્રશ અને કપડાથી ધોવા, નિસ્યંદિત પાણીથી કોગળા કરો અને સૂકવવા stand ભા રહો.

· ભેજ અને ધૂળ હોલો પોલિમરથી પેદા કરી શકે છે. ઇલેક્ટ્રોફોરેસિસ પહેલાં, ગ્લાસ ક્લીનરથી ગ્લાસ પ્લેટ સાફ કરો અને તેને નરમ બ્રશથી સાફ કરો. નિસ્યંદિત પાણીથી ધોઈ લો અને કાગળ વાઇપથી સારી રીતે સૂકા. કાગળથી લૂછી નાખતા પહેલા 70% ઇથેનોલ સાથે કોગળા કરવાથી સૂકવણી સાફ કરવામાં અને ઝડપી બનાવવામાં મદદ મળે છે. ક્રમિક રીતે ry ક્રિલામાઇડના નમૂનાઓ ઉમેરો: બીઆઈએસ, પાણી, બફર સોલ્યુશન, એમોનિયમ પર્સલ્ફેટ, ટેમ્ડ. સારી રીતે હલાવો અને તરત જ રેડવું.

પોલિમરાઇઝેશન પહેલાં પોલિઆક્રિલામાઇડને ડિગાસ કરવું જરૂરી નથી. (Ry ક્સિજન પોલિમરાઇઝેશનને અટકાવે છે તે પરપોટા દૂર કરવા માટે ry ક્રિલામાઇડ વેક્યૂમમાં મૂકવામાં આવતો હતો.)

આડી ગુંદર બિંદુ નમૂના ટીપ્સ.

Bot કાળા કાગળનો ટુકડો તળિયે બ box ક્સમાં મૂકો, કાળા પૃષ્ઠભૂમિ વધુ સ્પષ્ટ રીતે જોવા માટે કેટલાક નમૂનાના છિદ્ર બનાવવા માટે.
· ગ્લુ ટાંકીથી ભરેલા બફર, ફક્ત કોલોઇડ ઉપર.
· જો ધારમાં પ્રકાશ હોય, તો લાઇટ્સ ચાલુ કરો, પ્રકાશને કોલોઇડ કરવા દો. નમૂનાને પાઇપિટમાં દોરો.
Auto સ્વચાલિત પાઇપિંગ ડિવાઇસનો ઉપયોગ.
10 10-200 માં એમયુ 1 પ્રવાહી મૂવિંગ પોઇન્ટનો ઉપયોગ નમૂનાના મોટાભાગના પોઇન્ટમાં થઈ શકે છે. ખૂબ નાના નમૂનાના છિદ્રો (10μ1 કરતા ઓછા) માટે, ગુંદરને અનુક્રમિત કરવા માટે વપરાયેલ લાંબી પાઇપેટ હેડ વધુ અનુકૂળ છે.

· પાઇપિંગ ફક્ત નમૂનામાં ડૂબી જાય છે, ધીમે ધીમે પ્રવાહીને શ્વાસ લે છે. નમૂના ગ્લિસરિન સાથે સ્ટીકી દેખાઈ શકે છે, અને ઝડપી પમ્પિંગ પાઇપેટના માથામાં હવાના પરપોટા ખેંચી શકે છે.

Pip પાઇપિંગ માથાને શ્વાસમાં લીધા પછી, નમૂનાઓ, પાઇપની ધાર પર નરમાશથી પ્રવાહી માથું ખસેડશે અથવા કાગળ લૂછીને ટીપાંની બહાર પ્રવાહી માથું ચૂસી લે છે. નમૂનાને ચૂસવા માટે સાવચેત રહો.

નમૂનાને નમૂનાના છિદ્રમાં મૂકો

· પાઇપિંગ ડિવાઇસ થોડો દબાણ રાખવા માટે, નમૂનાઓ સહેજ ઓવરફ્લો લિક્વિડ હેડને ખસેડો.
Pip પાઇપિંગ હેડ બફરમાં દાખલ કરવામાં આવ્યું, જે સ્પોટ છિદ્રો કરતા થોડું વધારે છે, સકારાત્મક દબાણ જાળવે છે. પાઇપેટની ટોચ નાના છિદ્રમાં દાખલ કરી શકાય છે.
· ધીરે ધીરે અને સતત નમૂનાઓ બહાર. પાઇપેટ ટીપ પોઇન્ટ નમૂનાના છિદ્રની ઉપર મૂકવામાં આવે છે, અને નમૂના છિદ્રમાં ડૂબી જશે. નમૂનાને આગળ વધારવાને બદલે નમૂનાના છિદ્ર ભરવા માટે નમૂનાને ડૂબવા દો.
Lic પ્રવાહી માથા સાથે નમૂનાનો છેલ્લો ડ્રોપ એકવાર, પ્રવાહી બીજા પગ પર જશે, ધીમે ધીમે પ્રવાહી ચાલ વધારશે, બફરમાંથી બહાર નીકળી જશે

Vert ભી ગુંદર નમૂના કેવી રીતે કરવું?

Glass કાચનાં બે ટુકડાઓ વચ્ચે vert ભી ગુંદર બિંદુ નમૂનાના છિદ્રો. ખૂબ પાતળા ગુંદરમાં, બે ગ્લાસ પ્લેટો વચ્ચે પાઇપેટ માથું પણ દાખલ કરી શકાતું નથી. ગ્લિસરિન જુઓ! નમૂનાના છિદ્ર પર પાઇપેટ માથું મૂકો અને નમૂના છિદ્રમાં ડૂબી જશે.
Point પોઇન્ટ નમૂના પહેલાં, પોલીપ્રોપીલિન એસીલ જેલ નમૂનાના છિદ્રનો vert ભી બિંદુ મૂકવાનું ભૂલશો નહીં, તે સાફ છે. નમૂનાના છિદ્રના તળિયે દેખાઈ શકે તેવા અનપોલિમિરાઇઝ્ડ ry ક્રિલામાઇડ અને પાણીને ધોઈ નાખો. પાણી નમૂનાના છિદ્રને નોંધપાત્ર રીતે નાનું બનાવી શકે છે. 25 એમએલ અથવા 50 એમએલ સિરીંજ અને 18-ગેજ સોયનો ઉપયોગ કરો. ઇલેક્ટ્રોફોરેસિસ બફરમાં રેડવું અને કાળજીપૂર્વક નમૂનાના છિદ્રને ફ્લશ કરો.
Sample નમૂનાના છિદ્ર જોવાનું મુશ્કેલ હોઈ શકે છે, પરંતુ તે જ સમયે, બાકીનું સરળ છે. જો ત્યાં વધારે છિદ્રો હોય, તો નમૂના બફર બ્રોમોફેનોલ વાદળી સાથે ચકાસી શકાય છે.