પોલિએક્રાયલામાઇડ જેલ ઇલેક્ટ્રોફોરેસીસ માટે સાવચેતીઓ

· પોલિએક્રિલામાઇડજેલ એક્રિલામાઇડ મોનોમર, પોલિમરાઇઝેશન પ્રારંભિક સામગ્રી, ઉત્પ્રેરક, અને મીઠું અને બફર મિશ્રણનો અધિકાર એકસાથે જ જોઈએ.

· એક્રેલામાઇડઅને BIS (N, N' - મેથીલીન ડબલ એક્રેલામાઇડ) એ મોનોમર ફોર્મ જેલ મેટ્રિક્સ છે.

એમોનિયમ પર્સલ્ફેટ એડહેસિવ પોલિમરાઇઝેશન પ્રક્રિયા શરૂ કરે છે. ગુંદરની રચના માટે પાણીમાં તૈયાર 10% એમોનિયમ પર્સલ્ફેટ દ્રાવણની જરૂર પડે છે. મોટાભાગની માહિતી સક્રિય ઉપયોગની જરૂરિયાત દર્શાવે છે. જો કે, 10% સોલ્યુશનને પ્રવૃત્તિમાં નોંધપાત્ર નુકશાન વિના કેટલાક અઠવાડિયા માટે 4℃ પર મૂકી શકાય છે. 10 મિલી સુધી બનાવો અને જ્યારે ગુંદર એકત્ર થવામાં નિષ્ફળ જાય ત્યારે કાઢી નાખો.

ટીપ: ની ટકાવારીએક્રેલામાઇડક્રમમાં ગુંદર અને પ્રોટીન ગુંદર સમાન નથી. જો પ્રીમેઇડ એક્રેલામાઇડ: BIS સોલ્યુશનનો ઉપયોગ કરી રહ્યાં હોવ, તો યોગ્ય બોટલ મેળવવાની ખાતરી કરો.

· TEMED (N, N, N ', N' - ટેટ્રામેથાઇલ ઇથિલેનેડિયામાઇન) રેફ્રિજરેટરમાં મૂકવામાં આવેલી બ્રાઉન બોટલમાં એક ઉત્પ્રેરક છે. ગુંદર રેડતા પહેલા જ ઉમેરો.

· ઇલેક્ટ્રોફોરેસીસમાં વપરાયેલ પોલિએક્રાયલામાઇડ ઇલેક્ટ્રોફોરેસીસ કાચ દરેક વખતે પહેલા અને પછી ધોવા જોઈએ. ઇલેક્ટ્રોફોરેસીસ પછી, ગરમ સાબુવાળા પાણીમાં નરમ બ્રશ અને કપડાથી ધોઈ લો, નિસ્યંદિત પાણીથી કોગળા કરો અને સૂકવવા માટે ઊભા રહો.

હોલો પોલિમર સાથે ભેજ અને ધૂળનું કારણ બની શકે છે. ઇલેક્ટ્રોફોરેસીસ પહેલા, ગ્લાસ પ્લેટને ગ્લાસ ક્લીનરથી સાફ કરો અને તેને સોફ્ટ બ્રશથી સાફ કરો. નિસ્યંદિત પાણીથી ધોઈ લો અને પેપર વાઇપ વડે સારી રીતે સુકાવો. કાગળ વડે લૂછતાં પહેલાં 70% ઇથેનોલ વડે કોગળા કરવાથી તેને સાફ કરવામાં અને સૂકવણીને ઝડપી કરવામાં મદદ મળે છે. ક્રમિક રીતે એક્રેલામાઇડના નમૂનાઓ ઉમેરો: BIS, પાણી, બફર સોલ્યુશન, એમોનિયમ પર્સલ્ફેટ, TEMED. સારી રીતે હલાવો અને તરત જ રેડવું.

પોલિમરાઇઝેશન પહેલાં પોલિએક્રીલામાઇડને ડીગાસ કરવું જરૂરી નથી. (પરપોટાને દૂર કરવા માટે એક્રેલામાઇડને વેક્યૂમમાં મૂકવામાં આવતું હતું કારણ કે ઓક્સિજન પોલિમરાઇઝેશનને અટકાવે છે.)

આડી ગુંદર બિંદુ નમૂના ટીપ્સ.

· તળિયે બૉક્સમાં કાળા કાગળનો ટુકડો મૂકો, વધુ સ્પષ્ટ રીતે જોવા માટે કેટલાક નમૂના છિદ્ર બનાવવા માટે કાળી પૃષ્ઠભૂમિ.
· ગુંદર ટાંકી ભરેલ બફર, ફક્ત કોલોઇડ પર.
જો ધાર પર પ્રકાશ હોય, તો લાઇટ ચાલુ કરો, પ્રકાશને કોલોઇડને ચમકવા દો. પીપેટમાં નમૂના દોરો.
· આપોઆપ પાઇપિંગ ઉપકરણનો ઉપયોગ કરીને.
· 10-200 mu માં 1 પ્રવાહી મૂવિંગ પોઈન્ટનો ઉપયોગ નમૂના પરના મોટાભાગના પોઈન્ટમાં થઈ શકે છે. ખૂબ જ નાના નમૂનાના છિદ્રો (10μ1 કરતા ઓછા) માટે, સિક્વન્સિંગ ગુંદર માટે ઉપયોગમાં લેવાતા લાંબા પિપેટ હેડ વધુ અનુકૂળ છે.

· પાઇપિંગ માત્ર નમૂનામાં ડૂબી જાય છે, ધીમે ધીમે ફરતા પ્રવાહીને શ્વાસમાં લે છે. નમૂનો ગ્લિસરીનથી ચીકણો દેખાઈ શકે છે, અને ઝડપી પમ્પિંગ પિપેટ હેડમાં હવાના પરપોટા ખેંચી શકે છે.

· પાઇપિંગ હેડને શ્વાસમાં લીધા પછી નમૂનાઓ, પ્રવાહીના માથાને પાઇપની ધાર પર હળવેથી ખસેડશે અથવા કાગળ લૂછીને પ્રવાહી વડાને ટીપાંની બહાર ચૂસે છે. સેમ્પલ ચૂસી ન જાય તેનું ધ્યાન રાખો.

નમૂનાના છિદ્રમાં નમૂના મૂકો

· થોડું દબાણ રાખવા માટે ઉપકરણને પાઇપિંગ કરો, નમૂનાઓને ઓવરફ્લો લિક્વિડ હેડને સહેજ ખસેડો.
· બફરમાં દાખલ કરેલ પાઇપિંગ હેડ, સ્પોટ હોલ્સ કરતા સહેજ ઊંચો, હકારાત્મક દબાણ જાળવી રાખે છે. પાઇપેટની ટોચને નાના છિદ્રમાં દાખલ કરી શકાય છે.
· ધીમે ધીમે અને સતત નમૂનાઓ બહાર. પીપેટની ટીપ બિંદુ નમૂનાના છિદ્રની ઉપર મૂકવામાં આવે છે, અને નમૂના છિદ્રમાં ડૂબી જશે. દાખલ કરવાને બદલે નમૂનાના છિદ્રને ભરવા માટે નમૂનાને ડૂબવા દો.
· એકવાર પ્રવાહીના માથા સાથેના નમૂનાના છેલ્લા ટીપાં પછી, પ્રવાહી બીજા પગ પર જશે, ધીમે ધીમે પ્રવાહીની ચાલને વધારશે, બફરની બહાર જશે

વર્ટિકલ ગુંદર સેમ્પલિંગ કેવી રીતે કરવું?

કાચના બે ટુકડા વચ્ચે ઊભી ગુંદર બિંદુ નમૂનાના છિદ્રો. ખૂબ જ પાતળા ગુંદરમાં, પીપેટનું માથું કાચની બે પ્લેટ વચ્ચે પણ દાખલ કરી શકાતું નથી. ગ્લિસરીન જુઓ! નમૂનાના છિદ્ર પર પિપેટનું માથું મૂકો અને નમૂના છિદ્રમાં ડૂબી જશે.
· બિંદુ નમૂના પહેલાં, પોલીપ્રોપીલીન એસિલ જેલ નમૂના છિદ્ર ના ઊભી બિંદુ મૂકવામાં ખાતરી કરો સ્વચ્છ rinsed છે. બિનપોલિમરાઇઝ્ડ એક્રેલામાઇડ અને સેમ્પલ હોલના તળિયે દેખાતા પાણીને ધોઈ નાખો. પાણી નમૂનાના છિદ્રને નોંધપાત્ર રીતે નાનું બનાવી શકે છે. 25ml અથવા 50ml સિરીંજ અને 18-ગેજ સોયનો ઉપયોગ કરો. ઇલેક્ટ્રોફોરેસીસ બફરમાં રેડો અને નમૂનાના છિદ્રને કાળજીપૂર્વક ફ્લશ કરો.
· નમૂનાના છિદ્રને જોવું મુશ્કેલ હોઈ શકે છે, પરંતુ તે જ સમયે, બાકીનું સરળ છે. જો ત્યાં વધુ છિદ્રો હોય, તો સેમ્પલ બફરને બ્રોમોફેનોલ વાદળી સાથે ચકાસી શકાય છે.